产品概述
    本产品是一种具有高效转染、低毒性的阳离子聚合物核酸转染试剂，适用于大多数的真核细胞，可以用于原代细胞和悬浮细胞体外转染。本品为经过优化的纳米材料，它不仅改善了转染试剂存在细胞毒性的问题，对于大多数细胞，转染72小时后不更换培养基无明显毒性；同时在血清存在的条件下，也能达到高效的转染效果。



操作步骤
（以24孔板为例，如使用其它规格培养板/皿，请参照转染试剂建议使用剂量标准进行调整。为了获得最佳转染效果，请根据实验优化使用剂量）

1. 接种细胞

贴壁细胞：转染前一天，接种适量细胞（0.5 ~ 2×10⁵）接种至500 μl不含抗生素的培养基中，使转染时细胞密度达到70 ~ 80%汇合度。
悬浮细胞：转染前，接种4~ 8×10⁵个/孔于500 μl不含抗生素的培养基中。

2. 转染复合物配制（以24孔板每孔用量为参考）

1. 取0.8 μg质粒DNA稀释于50 μl无血清培养基中，轻轻吹吸混匀；
2. 取2 μl转染试剂稀释于50 μl无血清培养基中，充分混匀，室温条件下孵育5分钟；
3. 将a和b稀释的质粒和转染试剂混合，充分混匀（可涡旋振荡），室温条件下孵育20分钟；

3. 转染细胞：将孵育20分钟后的转染复合物以100 μl/孔加入24孔板的细胞中，轻轻摇匀。
4. 将细胞置于培养箱中培养18 ~ 48小时后检测细胞转染结果，此过程中可以不更换含转染复合物的培养基（对于敏感细胞建议在4 ~ 6小时后更换培养基）。

 
储存条件
4℃保存，1年有效；-20℃保存，2年以上有效；反复冻融不影响试剂的质量。
仅供科学研究使用

优化转染
    为了获得最佳的转染效果，降低其它因素的影响，需要根据具体实验情况，调整细胞接种密度、转染试剂/质粒DNA剂量来优化转染条件。敏感细胞可适当提高接种密度，确保细胞维持较高的增殖能力；转染试剂/质粒DNA剂量比例可在1:1至1:5之间调整。
 
转染试剂建议使用剂量
 

培养容器	细胞接种体积(ml)	DNA用量(μg)	转染试剂用量(μl)	稀释体积(μl)
96孔板	0.1	0.2	0.5	25
24孔板	0.5	0.8	2.0	50
12孔板	1	1.6	1.0	100
6孔板	2	4.0	10	250
6 cm板	5	8.0	20	500
10cm板	15	24	60	1500

（为了获得最佳转染效果，请根据实验优化使用剂量）
 
注意事项

1. 转染前必须确保细胞处于良好的生长状态；
2. 为避免细胞出现死亡，培养基中尽量不要添加抗生素；
3. 使用高纯度的质粒确保高效的转染效率；
4. 使用前充分摇匀转染试剂（或涡旋振荡），使转染试剂分布均匀；
5. 质粒和转染试剂稀释时，请使用无血清无抗生素的培养基（有条件可以使用Opti-MEM低血清培养基）；